澳洲進(jìn)口胎牛血清里有大片沉淀,這個(gè)正常嗎?
•說(shuō)明1: 血清非人工產(chǎn)品,有些東西沉淀出來(lái)系自然現(xiàn)象
–纖維蛋白原
–鹽析出。如磷酸鈣等
–膽固醇和脂肪酸
–蛋白析出
•說(shuō)明2: 沉淀在下列情況下還會(huì)增加:
–熱滅活
–37℃培養(yǎng) (常常由此引發(fā)歧異)
–反復(fù)凍融
–熔化中沒(méi)有搖勻
–gamma 照射
–長(zhǎng)期存放在 2-8°C
•另外我們還發(fā)現(xiàn):
-血清加入到RPMI 1640中時(shí),沉淀往往會(huì)發(fā)生或增加
–pH 升高時(shí),沉淀會(huì)增加
–在培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿中,因?yàn)榕囵B(yǎng)基的蒸發(fā)也會(huì)導(dǎo)致沉淀的增加
•說(shuō)明3: 沉淀不會(huì)影響其對(duì)細(xì)胞的促生長(zhǎng)作用
–我們的技術(shù)人員對(duì)此問(wèn)題的深入研究證明
–我們的客戶試驗(yàn)確認(rèn)
–請(qǐng)注意一個(gè)例外:沉淀影響巨噬細(xì)胞的培養(yǎng)
•說(shuō)明4: 這種現(xiàn)象發(fā)生在所有的血清中,包括我們的競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手.
–Gibco的網(wǎng)站上說(shuō) “GIBCO 的胎牛血清沒(méi)有預(yù)老化,如果存放在2-8℃,血清中的各種蛋白或酯類有可能會(huì)凝聚析出,出現(xiàn)沉淀或混濁. 這種現(xiàn)象不會(huì)影響血清對(duì)對(duì)細(xì)胞的促生長(zhǎng)作用.我們建議把血清存放在 –20℃,并避免反復(fù)凍融。
-Sigma胎牛血清說(shuō)明書(shū)中說(shuō): “在熔化過(guò)程中混濁多絮狀沉淀,這中現(xiàn)象對(duì)多數(shù)血清來(lái)說(shuō)是正常的,并不影響其使用質(zhì)量
–其他品牌: “蛋白質(zhì)的沉淀并非不正常,即使按照說(shuō)明正確進(jìn)行血清的溶解過(guò)程中也不可避免。這種現(xiàn)象很正常,且不會(huì)影響血清的促生長(zhǎng)作用.”這中沉淀對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)也沒(méi)有毒害。但它影響血清的外觀,影響瓶與瓶之間的一致性.”
•說(shuō)明5: 血清并沒(méi)有被污染.
–檢測(cè)血清是否被污染的方法是將血清接種到血酯板上,培養(yǎng)后看是否有菌落形成.
–在 1000x顯微鏡下,有經(jīng)驗(yàn)的微生物學(xué)家通過(guò)觀察有無(wú)格蘭仕染色的細(xì)菌,也可以判斷血清是否被污染