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細胞培養(yǎng)基的相關知識點分析

發(fā)布日期: 2020-04-02
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   細胞培養(yǎng)基是專門為正常人類微血管內(nèi)皮細胞體外培養(yǎng)設計的適于其生長的*培養(yǎng)基。是經(jīng)滅菌的液體培養(yǎng)基,包含必需和非必需氨基酸、維生素、有機和無機化合物、激素、生長因子、微量礦物質(zhì)和低濃度胎牛血清(5%)。該培養(yǎng)基緩沖體系為重碳酸鹽,在含5%CO2的細胞培養(yǎng)箱中平衡后pH值為7.4。該培養(yǎng)基的配方能夠選擇性的促進正常人類微血管內(nèi)皮細胞體外培養(yǎng)中的增殖和生長,并為其達到理想營養(yǎng)平衡狀態(tài)。
  細胞培養(yǎng)的意義
 ?、笨梢赃M行植物體外受精及植物胚胎發(fā)育過程研究。
 ?、部梢赃M行植物生長發(fā)育有關的重要基因或影響因素的研究。
 ?、晨梢苑奖愕赝ㄟ^實驗手段培育植物新品種。
  細胞培養(yǎng)基優(yōu)點:
  - 成份確定:無需飼養(yǎng)層的人多能干細胞培養(yǎng)基;
  - 充分驗證:> 1100篇同行評審的文獻中被引用;
  - 效果穩(wěn)定:含有預篩選的成份(包括BSA),使培養(yǎng)基效果穩(wěn)定,且能夠保護培養(yǎng)物免受內(nèi)毒素和培養(yǎng)環(huán)境壓力的影響;
  - *的培養(yǎng)hPSC的金標準;
  - 已經(jīng)用于60多種iPS細胞系。
  細胞培養(yǎng)基使用的注意事項:
  (1)細胞培養(yǎng)用水一般為三蒸水(經(jīng)石英蒸餾器蒸餾)或超純水,醫(yī)藥生產(chǎn)上一般為注射用水。
 ?。?)建議盡量選擇與所用量相匹配的包裝一次使用,因為包裝一旦打開,組分可能會變質(zhì)或因受潮而結團。
 ?。?)溶解干粉培養(yǎng)基時先加入終體積90%~95%的培養(yǎng)用水,添加劑加完后再補足。
 ?。?)如需添加的組分較多時,某一組分*溶解后,再添加另一組分。
 ?。?)待培養(yǎng)基*溶解后再加入碳酸氫鈉,以免產(chǎn)生沉淀。
  (6)所有成分*溶解后,培養(yǎng)基應立即過濾或高壓除菌,以免產(chǎn)生沉淀或有微生物污染。
  (7)由于除菌過濾后,pH值可能會升高0.1~0.2個單位,因此在過濾前,可將pH調(diào)至比所需值低0.1~0.2個單位。
 ?。?)在細胞培養(yǎng)過程中,建議不加或加少量的抗生素,如血清的濃度較低則所加抗生素的量也要相應降低一些。
 ?。?)建議用1NHCl或1NNaOH來調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH,因為用碳酸氫鈉調(diào)pH值對培養(yǎng)液的滲透壓影響比較大。
  細胞培養(yǎng)基是人工模擬細胞在體內(nèi)的生長環(huán)境,是提供細胞營養(yǎng)和促進細胞生長增殖的物質(zhì)基礎。當它是粉劑時,傾向性地稱為培養(yǎng)基,將粉劑配成液體后,多稱為培養(yǎng)液。培養(yǎng)液中常補加血清、抗生素等營養(yǎng)成分。
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