什么是胎牛血清?
胎牛血清是通過母牛剖腹產胎牛心臟密閉穿刺采血獲得的新鮮胎牛全血,經自然層析、離心后收集得到去除血細胞、纖維蛋白等成分的淡黃色透明上清液體,后經生產使用多級高置流膜過濾技術和三級0.1µm終端微濾方法處理后,常用于細胞培養(yǎng)相關實驗。
胎牛血清的重要性
細胞培養(yǎng)是很多下游實驗的基礎,細胞培養(yǎng)的好壞會直接影響后續(xù)實驗的成功和穩(wěn)定,而胎牛血清作為細胞培養(yǎng)的主要試劑對實驗的重要性不言而喻!
胎牛血清是細胞培養(yǎng)中常用的天然培養(yǎng)基,因為胎牛未進食過母乳,所以IgG含量低,且含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成份,故目前多數實驗人員選擇的都是胎牛血清進行動物細胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。
? 提供對維持細胞指數生長的激素,基礎培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。
? 提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結合或調變它們所結合的物質活力。
? 有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到解毒作用。
? 是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質上所需因子來源。
? 起酸堿度緩沖液作用。
? 提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。
胎牛血清與其它牛血清有何區(qū)別?
根據牛出生時間和血清采集分離方法分為:
? 胎牛血清(Foetal Bovine Serum,簡稱FBS):胎牛血清是指懷孕3-8個月的母牛被屠宰后,發(fā)育未wanquan的胎牛心臟密閉穿刺采血后,通過一系列工藝處理最終獲得。此時胎牛血中含有特殊的生長發(fā)育因子,一旦胚胎發(fā)育wanquan這些因子會自動消失。
? 新生牛血清(Newborn Calf Serum,簡稱NBCS):出生14小時內未進食的新生牛,通常采用頸動脈采集血液分離得到的血清。
? 小牛血清(Calf Serum):出生后3天至6月齡小牛動脈采血分離血清。
? 成年牛血清(Adult Bovine Serum,簡稱ABS)指的是屠宰時收集全血后分離得到血清。
胎牛血清要求:
1、性狀、外觀:淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。
2、蛋白質含量:3.5%~5.0%( w/v)
3、血紅蛋白含量:≤ 0.02%( w/v)
4、無菌檢驗:陰性
5、支原體檢驗:陰性
6、細菌內毒素:≤5(EU/ml)
7、牛腹瀉病毒:陰性
8、大腸桿菌噬菌體:陰性
9、支持細胞增殖:(Sp2/0-Ag14) 生長曲線 (接種濃度)最大增殖濃度 ≥2.5×106個/ml,細胞倍增時間:≤15h,克隆率:≥85%